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一、目的要求:
石蠟切片的制作和蘇木精、 曙紅染色法(簡稱H.E染色法),借以了解石蠟切片制作的基本原理和一般方法?! ?br/>二、實驗用具:
解剖器一套、單面刀片、切片刀、切片機、載玻片、蓋玻片、標本瓶、燒杯、量筒、漏斗、染色缸、樹膠瓶、酒精燈、毛筆、繪圖紙、濾紙、熔蠟箱(或恒溫箱)、展片臺(或燙板)、小木塊、蠟帶盒、烤片盒、切片托盤、磁力攪拌器。
三、實驗材料:
蛙或小白鼠。
四、實驗內容:
藥品:
1、70%、80%、90%、95%酒精及無水酒精?! ?br/>2、固定液
3、蛋白甘油:蛋白甘油是粘貼蠟片用的粘片劑。配方如下:取一新鮮雞蛋的蛋白,充分攪拌成雪花狀泡沫,然后濾去泡沫,加入等量甘油,使用磁力攪拌器攪拌均勻,再加入一小粒麝香草酚防腐。因甘油粘度較大 所以須用大功率的磁力攪拌器。梅穎浦的96-1大功率磁力攪拌器非合適本實驗?! ?br/>4、染色液:以H.E.染色法為例,需配制蘇木精染液和曙紅染液?! ?br/>5、鹽酸酒精:鹽酸酒精用于分色。配制方法是在100ml70%酒精中加入1ml鹽酸?! ?br/>6、其它:二甲苯、切片石蠟、中性樹膠等?! ?br/>操作步驟:
石蠟切片法是常用的一種制片法。其制作過程是:取材→固定→沖洗→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→貼片→烤片→脫蠟→復水→染色→脫水→透明→封藏。
五、注意事項:
1、制片是一個連續的操作過程,往往要連續幾天才能完成,因此,事先一定要制訂工作日程計劃,應按順序進行工作。這樣可避免和其它工作發生沖突,也不會因前后順序顛到或超過了規定的時間,給工作帶來不必要的損失?! ?br/>2、制片的各個步驟都是互相關聯的,如脫水不徹底就會影響到透明的程度,以至影響蠟塊的質量。為此,必須對任何一個步驟,都要細致、嚴格進行操作?! ?br/>3、通過本實驗可了解到每張切片都是來之不易的,因此,應倍加愛護,不要損壞
磁力攪拌器可廣泛應用于實驗室,是目前市場上安全可靠的攪拌器,承載樣品量從250毫升到25升不等,用于化學、生物技術、制藥、微生物和醫療等領域,培養微生物,溶解營養和固體物質,以及在滴定過程中防止懸浮物沉淀。
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